Page 38 - Программа - Всероссийский конгресс с международным участием «Нейронауки: интеграция теории и практики», 18-19 ноября 2022 года, Онлайн

Известия Российской
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Том 41, № 4, 2022 Военно-медицинской академии
387
АКТУАЛЬНОСТЬ и нейронах экзогенный Лф может пересекать гематоэнце-
фалический барьер и достигать нервных клеток [13, 14].
В настоящее время много усилий сосредоточено Целью исследования стало изучение влияния че-
на поиске агентов, способных ослабить прогрессирова- ловеческого Лф на поведение мышей в модели МФТП-
ние болезни Паркинсона (БП), предотвратить дальнейшую индуцированной гибели нейронов.
нейродегенерацию и восстановить дегенерированные до-
фаминергические нейроны [1]. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Трансляционные исследования с использованием
лабораторных животных позволяют углубленно изучать В работе был использован Лф, выделенный из жен-
механизмы, лежащие в основе процесса нейродегенера- ского молозива (ООО «Лактобио», Москва). Исследование
ции, и служат инструментом для поиска новых терапевти- было проведено на 5-месячных самцах мышей линии
ческих стратегий. Среди наиболее широко используемых С57BL/6 (ФГБУН ФИБХ РАН питомник «Пущино», Россия).
моделей БП — те, в которых применяют токсины. Нейро- Животные содержались в стандартных лаборатор-
дегенерация, индуцированная 1-метил-4-фенил-1,2,3,6- ных клетках (Techniplast, Италия) по 5 особей в каждой
тетрагидропиридином (МФТП) у мышей, является одной при контролируемых температуре и влажности воздуха
из таких моделей [2, 3]. Применение МФТП-модели по- со сменой темной и светлой фаз суток 12/12 ч при сво-
зволило пролить свет на патофизиологию, а также на не- бодном доступе к пище и воде. Все манипуляции с жи-
которые причины заболевания. Что еще более важно, оно вотными проводили в соответствии с ГОСТ 33215-2014
предоставило исследователям модельные платформы «Руководство по содержанию и уходу за лабораторными
для тестирования симптоматических и нейропротектив- животными. Правила оборудования помещений и орга-
ных препаратов. МФТП избирательно разрушает дофами- низации процедур», а также требованиями Локального
нергические нейроны нигростриатной системы, вызывая этического комитета по вопросам биомедицинских ис-
ряд симптомов, наблюдаемых при идиопатической БП [4]. следований НИЦ «Курчатовский институт» (протокол № 6
Эта мышиная модель ограничена быстрым развитием ток- от 22.11.2017), одобрившего настоящее исследование.
сикоза, в то время как идиопатическая форма БП про- Животные в случайном порядке были разделены
грессирует медленно. Двигательный дефицит не полно- на группы: контрольная (n = 14), МФТП1 (n = 12), МФТП2
стью повторяет тот, который наблюдается при БП, тем (n = 16), МФТП3 (n = 10), МФТП+Лф1 (n = 12), МФТП+Лф2
не менее мышиные МФТП-модели имитируют многие (n = 18) и МФТП+Лф3 (n = 10). Нейротоксин (40 мг/кг) вво-
аспекты заболевания [5, 6]. дили однократно подкожно [3, 11]. Контрольной группе
Лактоферрин (Лф) — многофункциональный гло- был введен 0,9 % раствор NaCl в эквивалентном объеме.
булярный гликопротеин из семейства трансферринов Лф (4,0 мг/животное, внутрибрюшинно) или фосфатный
с молекулярной массой около 80 кДа. Впервые он был буфер (pH 7,4; PBS) вводили: а) дважды — за 24 и 3 ч
идентифицирован в 1939 г. в коровьем молоке, а затем до МФТП (группы МФТП+Лф1 и МФТП1 соответственно);
в 1958 г. — в женском грудном. Этот белок широко пред- б) за 1 ч до МФТП (группы МФТП+Лф2 и МФТП2 соответ-
ставлен в различных секреторных жидкостях млекопита- ственно) или в) через 24 ч после МФТП (группы МФТП+Лф3
ющих, таких как молоко, слюна, секреты носовых желез, и МФТП3 соответственно). Дозировка белка и сроки его
слезы, а также в гранулах нейтрофилов. Лф участвует введения были основаны на данных литературы и резуль-
во многих физиологических и патофизиологических про- татах наших пилотных экспериментов. Массу тела мышей
цессах, включая связывание и транспорт ионов железа, измеряли еженедельно. Поведенческие функции живот-
иммунные и воспалительные реакции [7], модулирует ных оценивали с использованием тестов «Открытое поле»
целый спектр нейрональных процессов, усиливает экс- (ОП) и ротарод, анализа длины шага до инъекций и через
прессию генов, участвующих в выживании, дифферен- 60, 120 мин, 1, 2, 7 и 28 дней после введения МФТП/NaCl.
цировке и росте нейронов [8]. Лф активно исследуется Процедуры тестирования были подробно описаны нами
в экспериментальных патологических моделях заболева- ранее [11]. Во время тестирования в ОП проводили ре-
ний человека в качестве иммуномодулирующего, радио- гистрацию поведения мышей при помощи видеокамеры
протекторного агента [9, 10], белка, способного ослабить WV-CP500G (Panasonic, Япония) и системы видеореги-
прогрессирование нейродегенеративных заболеваний страции EthoVision XT 8.5 (Noldus Information Technology,
и стимулировать нейрорегенерацию [11]. Многочислен- Нидерланды). Полученные видеозаписи анализировали
ные исследования показали, что Лф обладает большим в программе EthoVision XT 8.5.
терапевтическим потенциалом. Повышенная экспрессия Статистическую обработку данных проводили в про-
Лф-рецепторов в мозге пациентов, страдающих нейро- граммном пакете GraphPad Prizm 8.0.1. Нормальность
дегенеративными заболеваниями, позволяет предполо- распределения проверяли с помощью критерия Шапиро–
жить, что Лф может играть важную роль в их патогенезе Уилка. В соответствии с типом распределения большин-
и саногенезе [12]. Благодаря наличию Лф-рецепторов ства данных использовали непараметрический однофак-
на эндотелиальных клетках капилляров головного мозга торный дисперсионный анализ Краскелл–Уоллиса ANOVA

DOI: https://doi.org/10.17816/rmmar111944